100 astaxanthin nguyên chấtđược tìm thấy trong các sinh vật biển như vi tảo (Haematococcus pluvialis), cá hồi, cá hồi, nhuyễn thể và tôm. Sự phổ biến ngày càng tăng của nó trong các ngành công nghiệp dinh dưỡng, mỹ phẩm, nuôi trồng thủy sản, thực phẩm và đồ uống được thúc đẩy bởi nghiên cứu sâu rộng nêu bật những lợi ích của nó, vượt trội so với nhiều chất chống oxy hóa khác như vitamin E và -carotene. Những lợi ích này bao gồm chống lại stress oxy hóa, giảm viêm, tăng cường sức khỏe làn da, tăng cường sức bền và hỗ trợ sức khỏe của mắt. Tuy nhiên, hiệu quả, độ an toàn và giá trị thị trường của các sản phẩm astaxanthin số lượng lớn về bản chất gắn liền với chất lượng, độ tinh khiết và nồng độ của chúng. Nhưng làm thế nào để kiểm tra astaxanthin?
Tầm quan trọng của việc kiểm tra Astaxanthin
Thị trường astaxanthin toàn cầu đang mở rộng nhanh chóng, dự kiến sẽ đạt hàng tỷ đô la trong những năm tới. Sự tăng trưởng này đi kèm với sự đa dạng của 100 sản phẩm astaxanthin nguyên chất: huyền phù gốc dầu tổng hợp so với tự nhiên,{2}}dầu, chiết xuất dạng bột, viên nang mềm và kem bôi. Sự đa dạng này đặt ra những thách thức đáng kể:
• Xác minh hiệu lực:
Sản phẩm có cung cấp liều lượng astaxanthin như quảng cáo không?
• Đánh giá độ tinh khiết:
Astaxanthin tự nhiên có chứa các dung môi có hại, kim loại nặng, thuốc trừ sâu và các chất gây ô nhiễm vi sinh vật không?
• Nhận dạng đồng phân lập thể:
Astaxanthin tự nhiên từ Haematococcus pluvialis hầu như chỉ ở dạng đối hình 3S,3'S có tính sinh học cao hơn. Astaxanthin tổng hợp, được sản xuất từ hóa dầu, là hỗn hợp của ba đồng phân lập thể (3S,3'S, 3R,3'S và 3R,3'R) và thường được coi là có hoạt tính sinh học thấp hơn. Việc phân biệt giữa chúng là rất quan trọng.
• Giám sát độ ổn định:
Astaxanthin 100 tinh khiết rất dễ bị phân hủy bởi oxy, ánh sáng và nhiệt. Thử nghiệm đảm bảo sản phẩm vẫn có hiệu lực trong suốt thời hạn sử dụng.
• Tính xác thực và giả mạo:
Astaxanthin tổng hợp có chi phí-thấp hơn hoặc các chất màu khác có thể được sử dụng để làm giả các sản phẩm tự nhiên đắt tiền hơn. Kiểm tra tinh vi là cần thiết để phát hiện gian lận này.
Do đó, một-giao thức thử nghiệm nhiều mặt là điều cần thiết đối với 100 nhà sản xuất, nhà cung cấp và người dùng cuối- astaxanthin thuần túy để đảm bảo rằng họ đang làm việc với một sản phẩm chính hãng, hiệu quả và an toàn. Các nhà cung cấp như Guanjie Biotech, với tư cách là nhà sản xuất astaxanthin số lượng lớn chuyên biệt, thực hiện các quy trình thử nghiệm này ở mọi giai đoạn, từ sinh khối thô đến chiết xuất thành phẩm, để đảm bảo tính toàn vẹn của sản phẩm.
Làm cách nào đểBài kiểm tra Astaxanthin?
Đo quang phổ
• Nguyên tắc:
Đây là phương pháp cổ điển, nhanh chóng và tiết kiệm chi phí-dựa trên sự hấp thụ ánh sáng ở các bước sóng cụ thể. 100 astaxanthin tinh khiết có đặc tính hấp thụ tối đa trong nhiều dung môi khác nhau (ví dụ: ~470-480 nm trong axeton, cloroform hoặc etanol).
• Phương pháp:
Hòa tan 100 mẫu astaxanthin tinh khiết trong dung môi thích hợp và đo độ hấp thụ bằng máy quang phổ UV-Vis. Nồng độ được tính toán bằng định luật Beer-Lambert (A=εcl), dựa vào hệ số tuyệt chủng phân tử được xác định trước cho astaxanthin (ví dụ: A1%1cm≈ 2100 trong etanol ở ~480 nm).
• Ứng dụng:
Phù hợp nhất để ước tính nhanh chóng, sơ bộ hàm lượng caroten tổng số trong sinh khối thô, bột tảo hoặc dầu cô đặc. Nó được sử dụng rộng rãi-để theo dõi quy trình.
• Hạn chế:
Nó thiếu tính đặc hiệu. Nó đo tổng số nhiễm sắc thể (hợp chất có màu) và không thể phân biệt giữa astaxanthin, este của nó, các carotenoid khác (như canthaxanthin hoặc -carotene) hoặc các sản phẩm thoái hóa. Việc chứng nhận sản phẩm cuối cùng đòi hỏi phải định lượng chính xác là không thể chấp nhận được.
Sắc ký lỏng hiệu suất cao (HPLC)
HPLC là phương pháp được lựa chọn rõ ràng để nhận dạng, phân tách và định lượng chính xác 100 astaxanthin tinh khiết và các dạng khác nhau của nó.
• Nguyên tắc:
HPLC tách hỗn hợp phức tạp của các hợp chất trong mẫu dựa trên sự phân chia khác biệt giữa pha tĩnh (cột) và pha động (dung môi). Các hợp chất riêng biệt sau đó được phát hiện và định lượng, thường sử dụng máy dò Photodiode Array (PDA).
• Cấu hình HPLC chính của Astaxanthin:
Đảo ngược-HPLC pha (RP-HPLC): Đây là cách thiết lập phổ biến nhất. Pha tĩnh không phân cực (ví dụ: cột C18) và pha động phân cực (ví dụ: metanol, axetonitril, nước, thường có các chất biến tính như etyl axetat hoặc diclometan) được sử dụng. Nó tách astaxanthin khỏi este của nó một cách xuất sắc (monoester rửa giải trước diester) và khỏi các carotenoid khác.
• HPLC bất đối:
Kỹ thuật chuyên biệt này sử dụng pha tĩnh bất đối được thiết kế để tách các chất đồng phân đối ảnh. Đây là phương pháp chính xác để phân biệt astaxanthin tự nhiên (3S,3'S) 100 tinh khiết với hỗn hợp tổng hợp (3S,3'S, 3R,3'S, 3R,3'R). Đây là một thử nghiệm quan trọng cho tính xác thực.
• Phát hiện:
Máy dò PDA rất quan trọng vì nó cung cấp phổ UV{0}}Vis của từng pic rửa giải từ cột. Dấu vân tay quang phổ này cho phép nhận dạng tích cực bằng cách so sánh phổ và thời gian lưu với tiêu chuẩn astaxanthin đích thực.
• Định lượng:
Việc định lượng đạt được bằng cách tích hợp diện tích pic của mẫu và so sánh chúng với đường cong hiệu chuẩn được xây dựng từ 100 chất chuẩn tham chiếu astaxanthin tinh khiết đã được chứng nhận có nồng độ đã biết. Điều này cho phép đo chính xác từng loại astaxanthin, monoesters và diester tự do.
Phương pháp HPLC-PDA điển hình cho este astaxanthin có thể sử dụng:
Cột: C18, 250 x 4,6 mm, 5 μm
Pha động: Độ dốc của dung môi A (Manol:Nước, 90:10) và dung môi B (Ethyl Acetate) hoặc phương pháp đẳng cấp với dung môi bậc ba.
Tốc độ dòng chảy: 1,0 mL/phút
Phát hiện: 470 nm
Nhiệt độ: 25 độ
• Chuẩn bị mẫu:
Chiết xuất là bước-quan trọng trước HPLC. Dầu có thể được pha loãng trực tiếp trong dung môi thích hợp. Sinh khối hoặc bột khô yêu cầu quy trình chiết xuất nghiêm ngặt hơn, thường sử dụng các dung môi như axeton, etyl axetat hoặc tetrahydrofuran (THF) bằng cách đập hạt-hoặc siêu âm để phá vỡ thành tế bào và đảm bảo chiết xuất hoàn toàn.
Phép đo khối phổ (LC-MS/MS)
• Nguyên tắc:
Việc ghép nối HPLC với Máy đo khối phổ (LC-MS hoặc LC-MS/MS) sẽ bổ sung thêm một lớp xác nhận và độ đặc hiệu tuyệt vời. Máy dò MS xác định các hợp chất dựa trên tỷ lệ khối lượng-trên-điện tích (m/z) của chúng.
• Ứng dụng:
Nhận dạng xác nhận: Cung cấp xác nhận trọng lượng phân tử chính xác. 100 astaxanthin nguyên chất có trọng lượng phân tử là 596,8 g/mol. Các este của nó sẽ có khối lượng cao hơn tương ứng (ví dụ, một monoester có axit béo MW 282 sẽ có khối lượng 596.8 + 282 - 18=860.8, gây ra sự mất nước trong quá trình este hóa).
• Phát hiện tạp chất dạng vết:
Hiệu quả cao trong việc xác định và định lượng mức độ thấp của các carotenoid, sản phẩm phân hủy hoặc chất gây ô nhiễm khác mà máy dò PDA có thể bỏ sót.
• Nghiên cứu về chuyển hóa:
Được sử dụng trong nghiên cứu để theo dõi astaxanthin và các chất chuyển hóa của nó trong các mẫu sinh học (máu, mô) để nghiên cứu sự hấp thụ, phân phối và khả dụng sinh học của nó.
Kiểm tra chất gây ô nhiễm và độ tinh khiết
• Dung môi dư:
Phương pháp sắc ký khí (GC) với Máy dò ion hóa ngọn lửa (FID) hoặc Máy quang phổ khối (MS) được sử dụng để phát hiện và định lượng các dung môi hữu cơ dễ bay hơi (ví dụ: hexane, ethanol, ethyl acetate) còn sót lại từ quá trình chiết xuất, đảm bảo chúng ở dưới giới hạn an toàn do dược điển đặt ra (ví dụ: USP<467>).
• Kim loại nặng:
Phương pháp quang phổ khối plasma kết hợp cảm ứng (ICP-MS) hoặc Quang phổ hấp thụ nguyên tử (AAS) được sử dụng để kiểm tra các kim loại độc hại như chì, asen, cadmium và thủy ngân. Các giới hạn rất nghiêm ngặt, thường tuân theo USP<232>/ Hướng dẫn ICH Q3D.
• Xét nghiệm vi sinh:
Các phương pháp đếm đĩa tiêu chuẩn được sử dụng để đảm bảo sản phẩm astaxanthin nguyên chất 100 nằm trong giới hạn an toàn đối với tổng số lượng vi khuẩn hiếu khí, tổng số nấm men và nấm mốc cũng như không có mầm bệnh cụ thể như E. coli, Salmonella và Staphylococcus.
• Thuốc trừ sâu:
GC-MS hoặc LC{1}}MS/MS được sử dụng để sàng lọc hàng trăm dư lượng thuốc trừ sâu tiềm ẩn, đặc biệt quan trọng đối với sinh khối tảo được nuôi trong các ao lộ thiên.
Kiểm tra độ ổn định
Độ ổn định được đánh giá bằng cách sử dụng các giao thức kiểm tra cấp tốc theo hướng dẫn ICH (Q1A(R2)). Các mẫu được bảo quản trong buồng ổn định trong điều kiện khắc nghiệt:
• Nhiệt độ tăng cao: ví dụ 40 độ ± 2 độ
• Độ ẩm cao: ví dụ 75% ± 5% RH
• Tiếp xúc với ánh sáng: theo ICH Q1B
100 mẫu astaxanthin nguyên chất được lấy theo các khoảng thời gian đã định (0, 1, 2, 3, 6 tháng) và được kiểm tra chủ yếu qua HPLC để tìm hàm lượng astaxanthin. Tốc độ phân hủy được phân tích để dự đoán thời hạn sử dụng của sản phẩm trong điều kiện bảo quản được khuyến nghị. Điều này cũng giúp tạo ra các sản phẩm ổn định với chất chống oxy hóa thích hợp (ví dụ, vitamin E) và bao bì (hộp đựng kín, đục).
Phần kết luận
Những lợi ích sức khỏe vượt trội của 100 astaxanthin nguyên chất đã đưa nó lên vị trí hàng đầu trong ngành công nghiệp thực phẩm chức năng và dinh dưỡng. Tuy nhiên, lời hứa này chỉ có thể được thực hiện nếu sản phẩm là chính hãng, mạnh mẽ, nguyên chất và ổn định. Do đó, việc thử nghiệm astaxanthin sẽ chuyển từ một quy trình kỹ thuật đơn thuần sang một trụ cột cơ bản về tính toàn vẹn của sản phẩm và niềm tin của người tiêu dùng.
Trong khi phép đo quang phổ đơn giản có vai trò giúp kiểm tra nhanh chóng thì HPLC{0}}PDA là công cụ không thể thiếu để định lượng và nhận dạng chính xác. HPLC Chirus và LC-MS/MS cung cấp bằng chứng dứt khoát cần thiết để xác thực astaxanthin tự nhiên và phát hiện độ tinh vi. Hơn nữa, một chế độ kiểm soát chất lượng toàn diện phải bao gồm các xét nghiệm tìm chất gây ô nhiễm như kim loại nặng, dung môi và vi khuẩn.
Nghiên cứu sâu rộng về 100 astaxanthin tinh khiết không chỉ khẳng định tính ưu việt về mặt sinh học của nó mà còn cung cấp cơ sở khoa học cho các kỹ thuật phân tích phức tạp này. Cuối cùng, trách nhiệm thực hiện việc kiểm tra nghiêm ngặt này thuộc về các nhà cung cấp. Nhà cung cấp astaxanthin nguyên chất 100% uy tín không chỉ đơn thuần là nhà kinh doanh. Đây là nhà sản xuất astaxanthin tự nhiên áp dụng thử nghiệm nghiêm ngặt vào toàn bộ quy trình sản xuất của mình. Guanjie Biotech là nhà cung cấp astaxanthin. Quy trình của chúng tôi bao gồm quá trình kiểm tra nghiêm ngặt ở mọi giai đoạn: từ nuôi cấy các chủng Haematococcus pluvialis thuần chủng đến giám sát trong-quy trình và quá trình chiết xuất cuối cùng. Mỗi lô sản phẩm astaxanthin số lượng lớn thành phẩm đều trải qua một loạt phân tích đầy đủ, bao gồm HPLC-PDA để đánh giá hiệu lực, GC để đánh giá dung môi, ICP-MS để đánh giá kim loại nặng và xét nghiệm vi sinh. Cam kết này, được ghi trong Giấy chứng nhận Phân tích (CoA) chi tiết, đảm bảo cho khách hàng một sản phẩm mạnh mẽ, xác thực, an toàn và ổn định.
Tài liệu tham khảo
[1] Capelli, B., Bagshaw, J., & Cysewski, GR (2013). Astaxanthin tổng hợp so với tự nhiên: Đánh giá về sinh khả dụng và hiệu quả. Tập đoàn Cyanotech.
[2] Fassett, RG, & Coombes, JS (2011). Astaxanthin: một tác nhân trị liệu tiềm năng trong bệnh tim mạch. Thuốc Hàng Hải, 9(3), 447–465.
[3] Hosseini, SM, Hashemi Gahruie, H., Razmjooie, M., và những người khác. (2020). Ảnh hưởng của điều kiện bảo quản đến tính ổn định của nanoliposome astaxanthin. Tạp chí Khoa học và Công nghệ Thực phẩm, 57(4), 1425–1434.
[4] Hội nghị quốc tế về hài hòa hóa (ICH). (2003). Thử nghiệm độ ổn định của dược chất và sản phẩm thuốc mới (Q1A(R2)).
[5] Hội nghị quốc tế về hài hòa hóa (ICH). (2005). Tạp chất: Hướng dẫn về dung môi dư (Q3C(R6)).
[6] Nishida, Y., Yamashita, E., & Miki, W. (2007). Hoạt động dập tắt của các chất chống oxy hóa ưa nước và ưa mỡ thông thường chống lại oxy cấp đơn bằng cách sử dụng hệ thống phát hiện phát quang hóa học. Khoa học Carotenoid, 11, 16-20.
[7] Turcato, A., Gianoncelli, A., & Ribaudo, G. (2022). Các chiến lược phân tích để đánh giá Astaxanthin và các dẫn xuất của nó trong các sản phẩm thương mại. Phân tử, 27(15), 4794.
[8] Dược điển Hoa Kỳ (USP). (2022).<467>Dung môi dư. Công ước Dược điển Hoa Kỳ.
[9] Dược điển Hoa Kỳ (USP). (2022).<232>Tạp chất nguyên tố-Giới hạn. Công ước Dược điển Hoa Kỳ.
[10] Yuan, JP, Peng, J., Yin, K., & Wang, JH (2011). Tác dụng tăng cường sức khỏe tiềm tàng của astaxanthin: một loại carotenoid có giá trị cao, chủ yếu có nguồn gốc từ vi tảo. Nghiên cứu Thực phẩm & Dinh dưỡng Phân tử, 55(1), 150–165.
